Activité neutralisante relative dans les préparations d’IgM, d’IgA et d’IgG polyspécifiques contre les superantigènes streptococciques du groupe A

Dans cette étude, nous avons comparé la capacité de différentes préparations d’immunoglobulines IgG, IgM et / ou IgA à neutraliser l’activité de l’exotoxine pyrogène streptococcique A SpeA ou surnageant de culture d’un isolat streptococcique du groupe A clinique. Toutes les préparations Ig ont inhibé de façon marquée le mitogène et la cytokine -une activité de SpeA et de surnageant de culture à des concentrations de – mg / mL, et à mg / mL, le plus souvent causé -% inhibition des deux stimuli Une inhibition P ⩽ significativement plus élevée de SpeA a été obtenue par IgG, IgM et IgA et IgA de Pentaglobin IgA et IgG, comparées aux préparations d’IgG pures Les préparations enrichies en IgM et IgA ont une activité inhibitrice significativement plus élevée contre SpeA que contre le surnageant de culture, alors que l’inverse est vrai pour les préparations d’IgG P ⩽ Les données montrent que les IgM et IgA sont des inhibiteurs puissants de superantigènes streptococciques spécifiques Ces résultats peuvent avoir des implications pour l’optimisation de l’immunothérapie dans les streptocoques invasifs l infections

L’immunoglobuline humaine polyspécifique administrée par voie intraveineuse était efficace dans diverses maladies humaines, telles que les maladies auto-immunes, les déficits immunitaires, la maladie de Kawasaki et le sepsis De plus, un effet bénéfique clinique des IgIV comme traitement adjuvant dans un choc toxique a été suggéré Plusieurs études de cas ont étayé par une étude comparative de cohorte qui a souligné l’intérêt de cette thérapie pour réduire la morbidité et la mortalité chez les patients atteints du syndrome de choc toxique streptococcique. Plusieurs modes d’action ont été décrits de l’activation du complément, de l’interaction Fc, de la neutralisation anti-idiotypique, des anticorps neutralisant la toxine et de la modulation des réponses cytokines [-,,] Les différents modes d’action des IgIV ne s’excluent pas mutuellement. réaction de l’hôteLe syndrome de choc toxique streptococcique est l’une des manifestations les plus graves Un streptocoque; Les effets systémiques observés dans les infections streptococciques invasives sévères du groupe A ont été principalement attribués à l’action des superantigènes streptococciques Les streptocoques du groupe A produisent plusieurs superantigènes différents, y compris les exotoxines pyrogènes streptococciques Spe A, B, C, F, G, H, et J , superantigènes streptococciques , et l’exotoxine mitogène streptococcique Z et Z- Comme superantigènes, ils activent un grand nombre de T Les expériences in vitro ont démontré une inhibition marquée de la capacité mitogène et inductrice de cytokines des streptocoques et staphylocoques superantigènes par IgIV En outre, IVIG a été montré pour inhiber la production de cytokines inflammatoires. contiennent des anticorps opsoniques contre la protéine M liée à la surface des bactéries streptococciques du groupe A La majorité des études de thérapie Ig de choc toxique les bactéries am-positives se sont concentrées sur les IgG; cependant, plusieurs études récentes suggèrent que les préparations d’IgIV enrichies en IgM sont supérieures dans le traitement de la septicémie néonatale et gram-négative, comparées aux préparations d’IgIV contenant uniquement des IgG En outre, l’IgA, l’Ig majeure dans la sécrétion muqueuse , sur les réponses au superantigène n’a jamais été étudiée Le but de cette étude était d’étudier les effets comparatifs de neutralisation des IgM, IgA et IgG polyspécifiques sur les superantigènes streptococciques

Matériel et méthodes

Réactifs et toxines Escherichia coli BL contenant pETb-speA a été aimablement fourni par le Dr C Collin et le Dr B Kline, Université de Miami, Floride. L’exotoxine pyrogène streptococcique recombinante A rSpeA a été exprimée et purifiée comme protéine de fusion His selon la recommandation de le fabricant Novagen, Madison, WI L’étiquette N-terminale His a été éliminée par digestion de la protéine de fusion avec U de thrombine par milligramme de rSpeA pour h à température ambiante avec le kit de capture de clivage de thrombine Novagen Le rSpeA digéré a été traité avec de la polymyxine B agarose Boehringer Mannheim, Indianapolis, IN pour h à température ambiante pour éliminer toute endotoxine contaminante rSpeA digéré par la thrombine contient des acides aminés supplémentaires à l’extrémité amino par rapport à SpeA natif , mais l’activité superantigénique était comparable à celle de SpeA natif en ce qui concerne mitogène – et activité cytokine-inductrice ainsi que la spécificité Vβ Un surnageant de culture concentré et dialyse préparé f Une souche streptococcique isolée d’un patient atteint du syndrome de choc toxique streptococcique a été utilisée comme préparation brute de superantigènes produits par cet isolat, comme décrit précédemment L’isolat était le sérotype T / B et le surnageant de culture. SpeB et SpeF, mais aucune SpeA détectable, tel que déterminé par analyse de transfert de WesternLa concentration optimale de SpeA et le surnageant de culture étaient respectivement ng / mL,: dilution, comme déterminé par des expériences de prolifération avec des cellules mononucléaires du sang périphérique PBMC de donneurs sains Phytohémagglutinine -L Sigma, St Louis, MO a été utilisé à une concentration de μg / mL dans les dosages de prolifération. Préparations d’IgG Quatre préparations d’IVIG, Gammagard S / D Baxter, Lessines, Belgique, IVIG-CP IVIG-CP [chromatographie purifiée]; Biotest Pharma, Dreieich, Allemagne, Pentaglobin Biotest Pharma, et IgAbulin Immuno AG, Vienne, Autriche, ont été inclus dans l’étude La composition d’Ig de chaque préparation est présentée dans le tableau Une préparation d’IgM Hu a été préparée à partir de Cohn III purifié par précipitation à l’acide octanoïque et chromatographie d’échange d’anions à une pureté de%, comme déterminé par ELISA, les IgG et IgM de table ont été retirées d’IgAbuline par plusieurs passages à travers des colonnes de protéine G et anti-IgM pour donner une préparation d’IgA% pur, déterminée par ELISA ou une table de néphélométrie Deux préparations d’IgA purifiées à partir de colostrum humain Sigma et le Dr J Mestecky, Département de Microbiologie, Birmingham, AL ont également été incluses

Tableau View largeDownload slideComposition de préparations IgM, IgA et IgGTable View largeTéléchargement de la composition des anticorps IgM, IgA et IgGLa mesure des anticorps anti-Spe par les anticorps ELISA Anti-SpeA, -SpeB et -SpeF dans les préparations Ig a été mesurée par ELISA, [SpeA recombinante, SpeB Toxin Technology purifiée, Sarasota, FL, ou SpeF recombinant ont été utilisés comme antigènes de revêtement, et des puits sans antigène ont été utilisés comme témoins pour la liaison non spécifique des préparations d’Ig Sérum bovin fœtal FBS dilué: a été utilisé comme un contrôle négatif Chaque préparation Ig diluée: et: a été analysée pour les anticorps IgA, IgM et IgG en utilisant les anticorps spécifiques à l’isotype conjugués à la peroxydase de raifort: anticorps monoclonaux IgA et IgA de souris, souris anti-humaine. Anticorps monoclonal IgM Southern Biotechnology, Birmingham, AL, et anticorps polyclonal de chèvre anti-IgG humaine Cappel Research Reagents, Costa Mesa, Californie Réaction de couleur wa s obtenu par l’addition du substrat, ‘- azino-di-éthylbenzthiiazoline-sulfonate ABTS Microwell peroxydase substrats systèmes, Kirkegaard & amp; Perry Laboratories, Gaithersburg, MD, et l’absorbance a été mesurée à nm. Tous les échantillons ont été dosés en triple. Les activités de liaison spécifiques Spe ont été normalisées à celles dans les puits sans antigène, selon l’équation suivante: Superantigen neutralisant des donneurs sains par centrifugation en gradient Ficoll-Hypaque et cultivés dans du milieu RPMI additionné de HEPES mM, de l-glutamine mM, de pénicilline U / streptomycine par ml et de% de cellules FBS inactivées à la chaleur et exemptes d’endotoxines. stimuli en l’absence ou en présence de diverses concentrations d’immunoglobulines – mg / mL Après jours, les cellules ont été puisées pour h avec μCi par puits d’activité spécifique de [H] -thymidine, Ci / mmol; DuPont, Wilmington, DE Tous les échantillons ont été dosés en triple et les données sont présentées en pourcentage d’inhibition de la mitogénicité des toxines, par rapport à des cultures sans Ig ajoutée. Des analyses de production de cytokines au niveau unicellulaire les divers stimuli en présence ou en l’absence de préparations d’Ig mg / mL et récoltées après et h de culture Les cellules ont été transférées sur des lames de verre d’adhérence Erie Scientific, Portsmouth, NH, fixées avec du formaldéhyde fraîchement préparé Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ dans PBS pour min, et colorées pour les cytokines comme décrit précédemment en détail Les anticorps monoclonaux spécifiques à la cytokine suivants ont été utilisés à des concentrations de μg / mL: IL-β IL-β; D, IgG murine; ImmunoContact, Lugano, Suisse, TNF-ß TNF-ß; LTX-, IgGb murine de Biosource, Camarillo, CA, et IFN-y IFN-y; -DK, -B-, IgG murine; provenant de MabTech, Stockholm, Suède, et en tant qu’anticorps secondaire, l’IgG de chèvre anti-souris biotinylée Caltag Lab, San Francisco, CA dilué: a été utilisé. La coloration immunohistochimique a été réalisée par Vectastain-Elite Vector Laboratories, Burlingame, CA en combinaison avec le substrat diaminobenzidine TOUCHE; Laboratoires vectoriels Les cellules productrices d’IFN-y et de TNF-ß ont été caractérisées par une coloration juxtanucléaire dense locale, tandis que l’IL-ß entraîne une coloration cytoplasmique, cohérente avec les découvertes antérieures Les données sont présentées en pourcentage de cellules productrices de cytokines. ± SDStatistical evaluation Le test U de Mann-Whitney ou l’analyse de variance de Kruskal Wallis ont été utilisés pour évaluer les différences significatives des données P & lt; était considéré comme significatif

Résultats

Différentes préparations d’IgM, d’IgA et d’IgG ont été testées pour leur capacité à neutraliser l’activité mitogène et cytokine d’un superantigène SpeA défini, ainsi qu’un surnageant de culture contenant un mélange de superantigènes et d’autres facteurs de virulence extracellulaires préparés à partir d’une souche clinique T Une analyse par transfert de Western du surnageant de culture a révélé qu’il contenait SpeB et SpeF, mais aucune donnée SpeA non montrée. Un total de différentes préparations d’Ig avec une composition variable d’isotype Ig a été étudiée, y compris des préparations d’IgG en tant qu’analyses IgG, IgM et Les préparations d’IgA ont pu neutraliser l’activité mitogène du SpeA et du surnageant de culture streptococcique du groupe A. Cependant, il existe des différences marquées dans le niveau de neutralisation des stimuli entre les différentes préparations d’IgA, d’IgM et d’IgG, l’activité inhibitrice la plus faible étant observée. la prolifération induite par la préparation d’IgM purifiée Hu SpeA était Par exemple, à mg / mL, la pentaglobine, l’IgAbuline et l’IgG ont provoqué des%,% et% d’inhibition de la réponse SpeA, respectivement. P ⩽ Les différences de capacité d’inhibition entre les préparations ont été inhibées significativement par Pentaglobin et IgA. A l’inverse, les préparations d’IgA purifiées à partir de colostrum n’ont pas provoqué d’inhibition significative. % de l’un ou l’autre des stimuli La toxicité non spécifique par les préparations d’Ig pourrait être exclue car la prolifération induite par la phytohémagglutinine-L n’était pas significativement inhibée, et l’inhibition mineure semblait être indépendante de la dose

Figure View largeTélécharger les préparations IgG, IgA et IgG neutralisent l’activité mitogène des superantigènes streptococciques Les cellules mononucléaires du sang périphérique Les PBMC provenant d’individus sains ont été stimulés par l’exotoxine pyrogène streptococcique Spe A, surnageant de culture préparé à partir d’un isolat streptococcique du groupe A ou PHY-PH. en présence ou en l’absence de diverses concentrations de différentes préparations d’Ig ▪, SpeA; ▵, surnageant de culture; •, La prolifération des PHA a été évaluée après plusieurs jours de culture, et les données sont présentées comme le pourcentage d’inhibition de l’activité mitogénique, calculé comme décrit dans «Matériel et Méthodes» Les données représentent la moyenne ± SE des expériences utilisant des cellules provenant de différents individus. Les différences d’inhibition de SpeA par rapport au surnageant de culture ont été évaluées par le test U de Mann-Whitney * P ⩽, ** P ⩽ L’immunoglobuline humaine polyspécifique administrée par intraveineuse et purifiée par chromatographie IVIG-CP a également été testée et a donné des résultats pratiquement identiques, comme montré pour Gammagard S / DFigure View largeTéléchargement Les préparations IgG, IgA et IgG neutralisent l’activité mitogène des superantigènes streptococciques Les cellules mononucléaires du sang périphérique Les PBMC provenant d’individus sains ont été stimulés par une exotoxine pyrogène streptococcique Spe A, un surnageant de culture préparé à partir d’un isolat streptococcique du groupe A ou PHYH. en présence ou en l’absence de divers concen trations de différentes préparations d’Ig ▪, SpeA; ▵, surnageant de culture; •, La prolifération des PHA a été évaluée après plusieurs jours de culture, et les données sont présentées comme le pourcentage d’inhibition de l’activité mitogénique, calculé comme décrit dans «Matériel et Méthodes» Les données représentent la moyenne ± SE des expériences utilisant des cellules provenant de différents individus. Les différences d’inhibition de SpeA par rapport au surnageant de culture ont été évaluées par le test U de Mann-Whitney * P ⩽, ** P ⩽ L’immunoglobuline humaine polyspécifique administrée par intraveineuse et purifiée par chromatographie IVIG-CP a également été testée et a donné des résultats pratiquement identiques, comme montré pour Gammagard S / DOf intérêt, une différence nette entre la neutralisation de SpeA et le surnageant de culture a été notée entre les préparations d’Ig IgM Hu et IgAbuline ayant une activité inhibitrice significativement plus élevée contre SpeA que contre le surnageant de culture P ⩽, alors que l’inverse était vrai pour IgG P & lt; ; Pour déterminer si cette différence d’activité neutralisante entre les préparations Ig a été attribuée au taux d’anticorps dirigés contre les superantigènes streptococciques, la présence d’anticorps dirigés contre des toxines définies a été déterminée par ELISA Toutes les préparations d’Ig contiennent des anticorps contre SpeA, SpeB et SpeF ; la distribution des anticorps IgA, M et G contre ces toxines correspond approximativement à la composition totale de l’isotype dans le tableau de préparation des Ig respectif; données non montrées Cependant, des traces d’anticorps IgG spécifiques de Spe, en particulier contre SpeF, ont pu être détectées dans la préparation d’IgA purifiée. Des valeurs ELISA plus élevées ont été systématiquement trouvées contre SpeB et SpeF par rapport à SpeA Important, il n’y avait aucune corrélation entre l’activité ELISA et activité neutralisante des préparations de Ig et suggérant des différences de qualité plutôt que de quantité d’anticorps neutralisants dans les diverses préparations

Figure Vue grandDivision Les préparations IgA, IgM et IgG contenant des anticorps dirigés contre les anticorps SpeA, SpeB et SpeF Anti-SpeA, -SpeB et -SpeF dans les préparations d’Ig ont été mesurées par ELISA. Chaque préparation Ig a été analysée pour détecter les anticorps IgA, IgM et IgG isotypes par l’utilisation d’anticorps isotypiques conjugués à la peroxydase de raifort La réaction colorée a été réalisée par l’addition du substrat, ‘-azino-di-éthylbenzthiiazoline-sulfonate, et l’absorbance a été mesurée à nm La figure montre l’activité ELISA Ig totale – c’est-à-dire IgA, IgM et IgG contre les barres non ombrées SpeA, les barres hachurées SpeB et les barres solides SpeFFigure Voir les grandes diapositivesIgA, IgM et IgG contenant des anticorps contre SpeA, SpeB et SpeF Anti-SpeA, -SpeB, et – Les anticorps anti-SpeF dans les préparations d’Ig ont été mesurés par ELISA. Chaque préparation d’Ig a été analysée pour détecter les anticorps IgA, IgM et IgG par l’utilisation d’anticorps isotypiques conjugués à la peroxydase de raifort. comme obtenu par l’addition du substrat, le ‘- azino-di-éthylbenzthiiazoline-sulfonate, et l’absorbance a été mesurée à nm La figure montre l’activité ELISA Ig totale, c’est-à-dire IgA, IgM, et IgG contre SpeA non ombrée Nous avons également analysé si les préparations d’IgM et d’IgA pouvaient neutraliser la capacité induite par les cytokines des superantigènes streptococciques. Les résultats montrés en figures démontrent que les IgM et IgA inhibent à la fois la monokine IL-β et la lymphokine TNF-β. Production d’IFN-γ La capacité d’induction des cytokines de SpeA a été presque complètement supprimée par toutes les préparations Ig testées, et il n’y avait pas de différence significative dans l’activité neutralisante entre les préparations d’Ig. les préparations d’Ig P = où la production d’IL-β induite par le surnageant de culture a été inhibée à% par Pentaglobin et Gammagard S / D, alors que Hu IgA enrichie, IgAbuline, et IgA purifiée seulement causé une inhibition%%% P & lt; ; figure

Figure View largeTélécharger les préparations IgG, IgA et IgG neutralisent l’activité cytokine-inductrice des superantigènes streptococciques Les cellules mononucléaires du sang périphérique PBMC provenant d’individus sains ont été stimulées avec des barres hachurées Spex A et un surnageant de culture préparé à partir d’un isolat streptococcique du groupe A Barres en présence ou en l’absence de différentes préparations d’Ig Après et h de culture, les cellules ont été transférées sur des lames de verre d’adhérence, fixées et colorées pour les cytokines intracellulaires en utilisant la technique immunohistochimique IL-β a été analysée après h de culture et TNF-β et IFN-γ après h de culture Les données sont présentées comme le pourcentage moyen d’inhibition ± SD des expériences utilisant des cellules d’individus différents. Des résultats très similaires, comme montré pour Gammagard S / D, ont été obtenus dans des cultures avec immunoglobuline humaine polyspécifique IVIG-CP purifié par chromatographie intraveineuse Dif statistiquement significatif La rupture dans la neutralisation de SpeA par rapport au surnageant de culture a été évaluée par le test U de Mann-Whitney et est indiquée sur la figure * P ⩽, ** P ⩽ Une différence significative entre les préparations d’Ig dans la neutralisation du surnageant de culture a pu être par Kruskal-Wallis analyse de la varianceFigure View largeTélécharger les préparations d’IgG, IgA et IgG neutralisent l’activité induisant la cytokine des superantigènes streptococciques Les cellules mononucléaires du sang périphérique PBMC provenant d’individus sains ont été stimulées avec des barres hachurées Spex A exotoxines pyrogènes streptococciques et un surnageant de culture préparé à partir d’un Après administration et h de culture, les cellules ont été transférées sur des lames de verre d’adhérence, fixées et colorées pour les cytokines intracellulaires par l’utilisation de la technique immunohistochimique IL-β a été analysée après de culture et TNF-β et IFN-γ après h de culture Les données sont p Des résultats très similaires, comme montré pour Gammagard S / D, ont été obtenus dans des cultures avec une immunoglobuline humaine polyspécifique administrée par voie intraveineuse et purifiée par chromatographie. IVIG-CP Différence statistiquement significative la neutralisation de SpeA par rapport au surnageant de culture a été évaluée par le test U de Mann-Whitney et est indiquée sur la figure * P ⩽, ** P ⩽ Une différence significative entre les préparations d’Ig dans la neutralisation du surnageant de culture a pu être observée par Kruskal -Wallis analyse de la variance

Figure Vue largeDownload slideInhibition dose-dépendante de la production de cytokine induite par le superantigène par les IgM, IgA et IgG Préparer des cellules mononucléaires sanguines périphériques Les PBMC d’un individu sain ont été stimulées avec une exotoxine pyrogène streptococcique Spe A et un surnageant de culture préparé à partir d’un streptocoque du groupe A isoler en présence ou en l’absence de diverses concentrations de IgM IgM, IgA and et IgG Gammagard S / D • Après et h de culture, les cellules ont été transférées sur des lames de verre d’adhérence, fixées et colorées pour les cytokines intracellulaires par immunohistochimie IL -β a été analysé après h de culture et TNF-β et IFN-γ après h de culture Les données sont présentées comme le pourcentage d’inhibition de la production de cytokinesFigure View largeTélécharger slideDose-dépendante de la production de cytokines induite par le superantigène par les IgM, IgA et IgG Cellules mononucléées du sang périphérique Les PBMC d’un individu sain ont été stimulées par le streptococc exotoxine pyrogénée Spe A ainsi qu’un surnageant de culture préparé à partir d’un isolât streptococcique du groupe A en présence ou en l’absence de diverses concentrations de IgM IgM, IgA et IgG Gammagard S / D Après et h de culture, les cellules ont été transférés à des lames de verre d’adhérence, fixées, et colorées pour les cytokines intracellulaires par technique immunohistochimique IL-β a été analysé après h de culture et TNF-β et IFN-γ après h de culture Les données sont présentées comme le pourcentage d’inhibition de la production de cytokine avec les expériences de prolifération, IgM Hu, IgAbuline et IgA étaient significativement plus puissants dans l’inhibition de la SpeA, en comparaison avec le surnageant de culture, induit la production de IL-ß P ⩽; figure La même chose était vraie pour l’inhibition par Hu de la production d’IFN-γ induite par SpeA, qui était significativement plus inhibée que la réponse IFN-γ induite par le surnageant de culture P =; Pour mieux vérifier les résultats susmentionnés, nous avons également réalisé une expérience dose-réponse avec différentes concentrations de préparations d’IgM, d’IgA et d’IgG. Comme le montre la figure, la production d’IL-β, de TNF-β et d’IFN-γ induite par le superantigène streptococcique était inhibée de manière dose-dépendante par IgM, IgA et IgG, et les différences entre les différentes préparations d’Ig ainsi qu’entre différents superantigènes étaient reproductibles aux différentes concentrations d’Ig

Discussion

était important d’examiner si IgM, IgA, ou les deux présentent des propriétés neutralisantes similaires contre les superantigènes streptococciques comme ceux décrits pour IgG [-,] Dans cette étude, nous démontrons que IgM et IgA à des concentrations correspondant à celles obtenues dans le plasma après une dose de g Les expériences ont révélé qu’il existait des différences dans l’activité neutralisante à la fois entre les préparations d’Ig et contre les différents superantigènes, mais la plupart des préparations d’Ig inhibaient presque les toxines. En outre, bien qu’une activité inhibitrice légèrement plus faible contre les superantigènes ait été notée pour la préparation d’IgA purifiée par rapport aux préparations d’IgG, le fait que l’IgA ait une activité neutralisante est pertinent sur le plan clinique parce que les IgA peuvent diffuser. sites non accessibles par IgGImportantly, préparations contenant une combinaison d’IgG, IgM et IgA étaient significativement plus puissants inhibiteurs de SpeA que les préparations contenant uniquement des IgG adrénaline. Après perfusion d’une préparation telle que la Pentaglobine enrichie en IgM, à des doses utilisées dans le traitement des maladies auto-immunes, on s’attendrait à IgM dans le plasma à des temps plus élevés que ceux utilisés dans nos expériences Nos données sont en accord avec plusieurs études de la thérapie IgIV dans les infections à Gram négatif, qui ont rapporté une plus forte teneur en anti-endotoxines dans Pentaglobin ainsi que des taux de mortalité en gram- De même, une étude de Haque et al a montré un effet supérieur de la Pentaglobine dans le traitement de la septicémie néonatale causée à la fois par des bactéries Gram positif et Gram négatif. que différentes préparations d’IgG montrent systématiquement une activité neutralisante plus élevée contre les surnageants de culture préparés à partir d’isolats cliniques que contre SpeA Les données présentées ici sont en accord avec ce rapport, dans la mesure où les préparations d’IgG neutralisaient le surnageant de culture T contenant SpeB et SpeF, mais pas SpeA plus que SpeA. En revanche, Pentaglobin, la préparation Hu enrichie en IgM et IgA Ces résultats suggèrent que l’immunité protectrice générée par SpeA peut être différente des autres Spes, et que IgM, IgA, ou les deux peuvent être particulièrement importants dans l’immunité protectrice humorale contre SpeAELISA détermination de la présence des anticorps spécifiques de Spe dans les préparations d’Ig ont indiqué que tous les anticorps dirigés contre SpeA, SpeB et SpeF et les taux d’anticorps spécifiques SpeB- et SpeF étaient systématiquement plus élevés que ceux de SpeA car la grande majorité des souches streptococciques du groupe A gène pour SpeB et SpeF, alors que la prévalence globale du gène spAA a été rapportée aussi faible que% , il semble que que l’exposition à SpeB et SpeF pourrait être supérieure à SpeA, affectant ainsi l’immunité humorale d’un intérêt particulier et en accord avec nos rapports précédents , les niveaux d’anticorps ELISA ne sont pas corrélés avec l’activité neutralisante, suggérant que l’activité neutralisante n’est pas Ceci a été clairement démontré pour l’IgA du colostrum, qui, contrairement à l’IgA sérique, n’a pas provoqué une inhibition substantielle des superantigènes streptococciques du groupe A malgré la présence de ces anticorps. Des niveaux identiques d’anticorps spécifiques au superantigène mesurés par ELISA Bien qu’il existe une interaction entre les systèmes immunitaires systémiques et sécrétoires, un certain degré de compartimentalisation peut néanmoins être observé. Par conséquent, les infections muqueuses superficielles peuvent conduire à une réponse immunitaire limitée au site local. toute influence sur les taux d’anticorps sériques contre le pathogène Conve En effet, l’immunisation systémique peut ne pas conduire à la sécrétion d’anticorps sur certains sites muqueux et il est possible que l’IgA du lait maternel contienne des anticorps dirigés contre d’autres épitopes de superantigènes streptococciques plutôt que des anticorps dans le sérum. En conclusion, l’étude a montré que les IgM et les IgA sont des inhibiteurs puissants des superantigènes streptococciques du groupe A et que les préparations d’Ig contenant une combinaison des isotypes IgG, IgM et IgA ont été les plus efficaces dans le traitement des anticorps anti-streptocoques. neutraliser l’activité superantigénique de SpeA Les effets de l’IgA peuvent être particulièrement importants pour la protection contre les infections des sites muqueux. Les résultats de cette étude suggèrent collectivement que l’optimisation du traitement par immunoglobulines chez les patients atteints d’infections streptococciques invasives sévères du groupe A peut être obtenue. Préparation d’Ig arations

Remerciements

Nous remercions le Dr Ulf Sundin, pour son assistance technique dans la purification des préparations d’IgA, et les Docteurs B Kline et C Collins, Université de Miami, pour le clone Bl contenant pETb-speA Le généreux don d’IgA purifié du colostrum, fourni par le Dr J Mesteckey, Département de microbiologie, Birmingham, Alabama, est également reconnu