Contre toute attente: Confirmation moléculaire d’un cas plausible de tuberculose osseuse

Nous rapportons l’utilisation du typage basé sur un nombre variable de répétitions en tandem d’éléments génétiques appelés “unités répétitives intercalées mycobactériennes” pour clarifier une situation embarrassante impliquant un patient avec un cas exceptionnel de spondylodiscite qui a initialement conduit à la suspicion d’un événement possible de laboratoire contamination croisée avec Mycobacterium tuberculosis

Cette technique présente l’avantage d’être plus rapide que le polymorphisme de longueur de fragment de restriction et d’être applicable à des extraits d’ADN bruts provenant de la chaleur. En outre, les types numériques résultants sont plus faciles à comparer que les profils de bandes IS. Le typage MIRU-VNTR fournit une discrimination adéquate des isolats de M tuberculosis pour une exclusion fiable des liens épidémiologiques dans les cultures de mycobactéries. Plusieurs situations Cette méthode est maintenant couramment appliquée pour la résolution rapide et précise des problèmes couramment rencontrés dans les examens cliniques mycobactériologiques, y compris, par exemple, l’investigation de l’infection nosocomiale, l’identification d’une infection mixte, et la contamination croisée en laboratoire. signaler l’utilisation de cette technique pour clarifier un énigme situation impliquant un patient avec un cas exceptionnel de spondylodiscite qui a conduit à la suspicion d’un éventuel cas de contamination croisée en laboratoire avec M tuberculose rapport de cas Un patient âgé de l’année A et un homme patient B ont été admis en rhumatologie Département de spondylodiscite lombaire Des biopsies lobaires L-L percutanées ont été réalisées chez les deux patients le même jour dans la même unité opératoire. Les échantillons ont été traités le même jour en laboratoire. Le patient A présentait des signes cliniques et radiologiques de tuberculose osseuse avec érosion des vertèbres. disque, très typique de la maladie de Pott Par conséquent, il a été immédiatement traité avec des médicaments antituberculeux, malgré le frottis négatif de son échantillon de biopsie. Par la suite, les cultures standard ont eu des résultats négatifs pour les bactéries aérobies et anaérobies classiques. B présentait une spondylodiscite septique avec bactériémie Contrairement au patient A, il n’avait Les résultats de la biopsie discale et de l’hémoculture étaient positifs pour Streptococcus gallolyticus. Par conséquent, cet agent bactérien était considéré comme responsable de la spondylodiscite septique, et un traitement, y compris la rifampicine et la lévofloxacine, a été entrepris. La bactérie habituellement commensale de la flore digestive nous a fait suspecter une pathologie colique qui a été confirmée par un examen coloscopique révélant un cancer du côlon chez ce patient. M jours plus tard, M tuberculosis a été isolé des échantillons de biopsie radiologique obtenus du patient A et bien plus. Le réexamen de la lame microscopique originale de l’échantillon de biopsie de disque a permis la détection de bacilles acido-résistants qui n’avaient pas été détectés lors du premier examen chez le patient. L’apparition simultanée de résultats de biopsie de disque le même jour dans la même unité de chirurgie était extr En effet, l’échantillon du patient B était candidat à un résultat faussement positif typique pour la tuberculose, selon les critères décrits par Ruddy et al : les données cliniques du patient étaient Contrairement à la tuberculose vertébrale, un diagnostic alternatif de spondylodiscite streptococcique a été posé, et un autre échantillon provenant du patient A traité le même jour dans le même laboratoire a donné des résultats positifs. Des procédures de laboratoire rigoureuses ont été suivies pour limiter la possibilité de transfert de bacilles. parmi les échantillons, une telle occurrence suggérait fortement un diagnostic erroné de la maladie du patient B. Une telle erreur aurait pu résulter de la contamination de l’échantillon du patient B par le prélèvement du patient A, seul autre échantillon de biopsie positif obtenu les jours précédents. qu’il pourrait y avoir eu un problème dans la livraison de la spe resp Pour évaluer la possibilité de contamination croisée en laboratoire, les isolats de M tuberculosis des deux patients ont été génotypés en utilisant le typage MIRU-VNTR basé sur les loci L’ADN chromosomique a été extrait de chaque patient. isoler, et les locus cibles ont été analysés par PCR multiplex à l’aide d’un séquenceur automatisé, comme décrit ailleurs De façon inattendue, cette analyse a révélé des différences dans un total de la table loci. Ce résultat a complètement éliminé la possibilité d’un résultats de culture positifs Cette observation soutient fortement la conclusion que l’échantillon de biopsie du patient B contenait véritablement des bacilles tuberculeux. Bien qu’il ait été difficile de déterminer la contribution exacte dans la spondylodiscite de ces bacilles par rapport aux streptocoques identifiés, le traitement du patient B était également adapté. inclure l’isoniazide pendant des mois

Table View largeTélécharger des échantillons de biopsie à partir d’une analyse basée sur un nombre variable de répétitions en tandem d’éléments génétiques appelés unités mycobactériennes intercalées répétitivesTable View largeTéléchargement de diapositives d’échantillons de biopsie basés sur un nombre variable de répétitions en tandem d’éléments génétiques appelées unités répétitives mycobactériennesDiscussion La plupart des rapports décrivant la confirmation de la contamination croisée mycobactérienne en laboratoire , ce rapport de cas montre l’utilité du typage moléculaire pour annuler de façon fiable un cas apparemment typique de contamination croisée en laboratoire Dans ce cas, sans typage moléculaire, les cliniciens auraient conclu qu’il y avait une erreur de laboratoire, et qu’ils n’auraient pas institué un traitement antituberculeux approprié Comme conséquence possible, le patient B aurait pu développer une souche mycobactérienne résistante aux médicaments et / ou développer une maladie plus grave. L’utilisation de MIRU-VNTR à base de PCR typer g au lieu du polymorphisme de longueur de fragment de restriction IS comme méthode de génotypage a permis une validation plus rapide des résultats de culture et un traitement rapide et correct Après l’achèvement du traitement du patient B, l’évolution clinique de sa maladie était favorable

Remerciements

Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: pas de conflits